Ang chromatography, nailhan usab nga "chromatographic analysis", "chromatography", usa ka separation and analysis method, nga adunay halapad kaayo nga mga aplikasyon sa analytical chemistry, organic chemistry, biochemistry ug uban pang natad.
Ang nagtukod sa chromatography usa ka Russian nga botanist nga si M.Tsvetter.Sa 1906, ang Russian nga botanista nga si Zvetter nagpatik sa mga resulta sa iyang eksperimento: Aron mabulag ang mga pigment sa tanom, iyang gibubo ang petroleum ether extract nga adunay mga pigment sa tanom ngadto sa usa ka glass tube nga adunay calcium carbonate powder ug gi-elute kini sa petroleum ether gikan sa ibabaw ngadto sa ubos.Tungod kay lain-laing mga pigmento adunay lain-laing mga adsorption kapasidad sa ibabaw sa calcium carbonate particles, uban sa proseso sa leaching, lain-laing mga pigments mobalhin sa lain-laing mga katulin, sa ingon pagporma banda sa lain-laing mga kolor.Ang mga sangkap sa pigment gibulag.Ginganlan niya kini nga pamaagi sa pagbulag nga chromatography.
Eskematiko nga representasyon sa usa ka eksperimento sa pagbulag sa pigment sa dahon sa tanum
Uban sa padayon nga pag-uswag sa mga pamaagi sa pagbulag, nagkadaghan nga walay kolor nga mga substansiya ang nahimong tumong sa pagbulag, ang chromatography usab anam-anam nga nawala ang kahulogan sa "kolor", apan ang ngalan gigamit gihapon karon.
Klasipikasyon sa Chromatographic
Ang esensya sa chromatography usa ka proseso diin ang mga molekula nga mabulag gibahin ug balanse tali sa naghunong nga hugna ug sa mobile nga bahin.Ang lainlaing mga substansiya lahi nga gibahin tali sa duha nga mga hugna, nga naghimo kanila nga molihok sa lainlaing mga tulin sa mobile phase.Uban sa paglihok sa mobile phase, lain-laing mga sangkap sa sagol nga gibulag gikan sa usag usa sa stationary phase.Depende sa mekanismo, kini mahimong bahinon ngadto sa lain-laing mga kategoriya.
1, sumala sa duha ka hugna nga pisikal nga klasipikasyon sa estado
Mobile phase: Gas chromatography, liquid chromatography, supercritical fluid chromatography
Nagpadayon nga hugna: gas-solid, gas-liquid;Liquid-solid, liquid-liquid
2, sumala sa porma sa klasipikasyon sa hunong nga hugna
Column chromatography: packed column chromatography, capillary column chromatography, micropacked column chromatography, preparative chromatography
Plane chromatography: papel chromatography, manipis nga layer chromatography, polymer membrane chromatography
3, giklasipikar sumala sa mekanismo sa pagbulag
Adsorption chromatography: Ang lainlaing mga sangkap gibulag sumala sa ilang adsorption ug desorption nga mga kapasidad sa mga adsorbents
Partition chromatography: Ang lainlaing mga sangkap gibulag sumala sa ilang pagkatunaw sa solvent
Molecular exclusion chromatography: sumala sa gidak-on sa molekular nga gidak-on sa separation ln ion exchange chromatography: lain-laing mga component sa affinity alang sa ion-exchange resin separation
Affinity chromatography: Pagbulag gamit ang presensya sa usa ka piho nga affinity tali sa biological macromolecules
Capillary electrophoresis: ang mga sangkap gibulag sumala sa mga kalainan sa paglihok ug / o pamatasan sa partisyon
Ang chiral chromatography gigamit alang sa pagbulag ug pagtuki sa chiral nga mga tambal, nga mahimong bahinon sa tulo ka mga kategoriya: chiral derivatization reagent method;Chiral mobile phase additive nga pamaagi;Chiral stationary phase resolution nga pamaagi
Panguna nga terminolohiya alang sa chromatography
Ang mga kurba nga nakuha pinaagi sa paglaraw sa mga signal sa pagtubag sa mga sangkap pagkahuman nakit-an ang pagbulag sa chromatographic batok sa oras gitawag nga chromatograms.
Baseline:Ubos sa piho nga mga kondisyon sa chromatographic, ang kurba sa signal nga namugna kung ang mobile phase lang ang moagi sa detector system gitawag nga baseline, ingon sa gipakita sa ot line.Kung ang kahimtang sa eksperimento lig-on, ang baseline usa ka linya nga parallel sa pinahigda nga axis.Ang baseline nagpakita sa kasaba sa instrumento, kasagaran ang detector, sa paglabay sa panahon.
Kinatas-ang gitas-on:ang bertikal nga gilay-on tali sa chromatographic peak point ug sa baseline, nga gipunting sa h, ingon sa gipakita sa linya sa AB.
gilapdon sa rehiyon:Ang gilapdon sa rehiyon sa chromatographic peak direktang may kalabutan sa pagkaayo sa pagbulag.Adunay tulo ka mga paagi sa paghulagway sa chromatographic peak width: standard deviation σ, peak width W, ug FWHM W1/2.
Standard deviation (σ):Ang σ mao ang katunga nga gilay-on tali sa duha ka mga inflection point sa normal nga kurba sa pag-apod-apod, ug ang bili sa σ nagpakita sa ang-ang sa pagkatibulaag sa mga sangkap gikan sa kolum.Kon mas dako ang bili sa σ, mas nagkatibulaag ang mga sangkap sa effluent, ug mas grabe ang epekto sa pagbulag.Sa kasukwahi, ang mga sangkap sa effluent gikonsentrahan ug maayo ang epekto sa pagbulag.
Peak gilapdon W:Ang mga intersection point sa duha ka kilid sa chromatographic peak gigamit isip tangent lines, ug ang intercept sa baseline gitawag nga peak width, o baseline width, nga mahimo usab nga ipahayag nga W, sama sa gipakita sa Figure IJ.Sumala sa prinsipyo sa normal nga pag-apod-apod, ang relasyon tali sa peak width ug standard deviation mahimong mapamatud-an nga W=4σ.
W1/2:Ang peak width sa katunga sa peak height gitawag ug FWHM, sama sa gipakita sa gilay-on sa GH.W1/2=2.355σ, W=1.699W1/2.
Ang W1/2, W pareho nga nakuha gikan sa σ ug gigamit sa pagkalkulo sa peak area dugang sa pagsukod sa epekto sa kolum.Ang pagsukod sa FWHM mas sayon ug kasagarang gigamit.
mubo nga summary
Gikan sa chromatographic peak outflow curve, ang mosunod nga mga tumong mahimong makab-ot:
a, Ang qualitative analysis gihimo base sa retention value sa chromatographic peak
b, quantitative analysis base sa area o peak sa chromatographic peak
C. Ang kahusayan sa pagbulag sa kolum gisusi sumala sa kantidad sa pagpadayon ug gilapdon sa peak sa chromatographic peak
Ang pormula sa pagkalkula nga nalangkit sa chromatography
1. Pagpabilin nga bili
Ang retention value kay usa ka parametro nga gigamit sa paghubit sa ang-ang diin ang usa ka sample component gipabilin sa column ug gigamit isip indicator sa chromatographic characterization.Ang pamaagi sa representasyon niini mao ang mosunod:
Panahon sa pagpabilin tR
Panahon sa kamatayontM
I-adjust ang oras sa pagpabilin tR'=tR-tM
(Total nga oras nga gigugol sa naghunong nga yugto)
Volume sa pagpabilin
VR=tR*F.(independente sa mobile phase velocity)
Patay nga volume
VM=tM*Fc
(Ang wanang wala giokupahan sa naghunong nga yugto sa agianan sa agianan gikan sa injector hangtod sa detektor)
I-adjust ang gidaghanon sa paghawid VR'=t'R*Fc
2. Relative retention nga bili
Relative retention value, nailhan usab nga separation factor, partition coefficient ratio o relative capacity factor, mao ang ratio sa adjusted retention time (volume) sa gisulayan nga component ngadto sa adjusted retention time (volume) sa standard ubos sa pipila ka chromatographic nga kondisyon.
Ang mga relatibong retensyon nga mga kantidad gigamit aron mawagtang ang impluwensya sa pipila nga mga kondisyon sa operasyon, sama sa rate sa pag-agos ug pagkawala sa fixative, sa mga kantidad sa pagpadayon.Ang sumbanan sa relatibong retensyon nga kantidad mahimong usa ka sangkap sa nasulayan nga sample o usa ka compound nga gidugang artipisyal.
3. Retention index
Ang retention index mao ang retention index sa substance i nga sulayan sa usa ka fixed solution X. Duha ka n-alanes ang gipili isip reference substance, ang usa adunay N carbon number ug ang usa adunay N+n.Ang ilang gipahiangay nga oras sa pagpabilin mao ang t 'r (N) ug t 'r (N+n), matag usa, aron ang gibag-o nga oras sa pagpabilin t 'r (i) sa substansiya nga sulayan mao gyud ang taliwala nila, kana mao, t 'r (N).
Ang indeks sa pagpabilin mahimong kalkulado sama sa mosunod.
4. Kapasidad hinungdan (k)
Sa equilibrium, ang ratio sa masa sa usa ka component sa stationary phase (s) ngadto sa mobile phase (m), gitawag nga capacity factor.Ang pormula mao ang mosunod:
5, Partition coefficient (K) Sa equilibrium, ang ratio sa konsentrasyon sa usa ka component sa stationary phase (s) ngadto sa mobile phase (m), gitawag nga partition coefficient.Ang pormula mao ang mosunod
Ang relasyon tali sa K ug k:
Kini nagpakita sa matang sa kolum ug ang knot importante nga mga kabtangan sa istruktura
mubo nga summary
Relasyon tali sa retention value ug capacity factor ug partition coefficient:
Ang Chromatographic separation gibase sa kalainan sa adsorption o dissolution nga abilidad sa matag component sa usa ka fixed relative sample, nga mahimong quantitatively nga gipahayag sa gidak-on sa partition coefficient K (o capacity factor k) value.
Ang mga sangkap nga adunay kusog nga adsorption o dissolution nga abilidad adunay dako nga partition coefficient (o kapasidad nga hinungdan) ug taas nga oras sa pagpadayon.Sa kasukwahi, ang mga sangkap nga adunay huyang nga adsorption o solubility adunay gamay nga partition coefficient ug usa ka mubo nga oras sa pagpadayon.
Batakang teorya sa chromatography
1. Teorya sa tray
(1) Ibutang sa unahan -- thermodynamic theory
Nagsugod kini sa modelo sa tower plate nga gisugyot ni Martin ug Synge.
Fractionating kolum: sa tray alang sa pipila ka mga higayon sa gas-liquid panimbang, sumala sa Nagabukal punto sa lain-laing mga pagbulag.
Kolum: Ang mga sangkap gibalanse sa daghang mga partisyon tali sa duha nga mga hugna ug gibulag sumala sa lainlaing mga coefficient sa partisyon.
(2) Pangagpas
(1) Adunay daghang mga tray sa kolum, ug ang mga sangkap dali nga makaabut sa panimbang sa pag-apod-apod sulod sa agwat sa tray (nga mao, ang gitas-on sa tray).
(2) Ang mobile phase mosulod sa kolum, dili padayon apan nagpul-ong, nga mao, ang matag tudling usa ka volume sa kolum.
(3) Kung ang sample gidugang sa matag column plate, ang pagsabwag sa sample sa axis sa column mahimong mapasagdan.
(4) Ang partition coefficient parehas sa tanang trays, independente sa gidaghanon sa mga component.Sa ato pa, ang partition coefficient kanunay sa matag taban.
(3) Prinsipyo
Schematic diagram sa teorya sa tray
Kung ang usa ka component sa unit mass, nga mao ang m=1 (pananglitan, 1mg o 1μg), idugang sa No. 0 tray, ug human sa distribution equilibrium, tungod kay k=1, nga mao ang ns=nm, nm=ns=0.5.
Sa diha nga ang usa ka plate volume (lΔV) sa carrier gas mosulod sa plate 0 sa porma sa pulsation, ang carrier gas nga naglangkob sa nm component sa gas phase giduso ngadto sa plate 1. Niini nga panahon, ang ns component sa liquid phase sa plate 0 ug ang bahin sa nm sa gas phase sa plate 1 iapod-apod pag-usab tali sa duha ka hugna.Busa, ang kinatibuk-ang kantidad sa mga sangkap nga anaa sa plate 0 mao ang 0.5, diin ang gas ug liquid phases matag 0.25, ug ang kinatibuk-ang kantidad nga anaa sa plate 1 mao usab ang 0.5.Ang gas ug likido nga mga hugna usab 0.25.
Kini nga proseso gisubli sa matag higayon nga ang usa ka bag-o nga plate volume carrier gas gipul-ong ngadto sa kolum (tan-awa ang lamesa sa ubos).
(4) Chromatographic outflow curve equation
σ mao ang standard deviation, mao ang retention time, C mao ang konsentrasyon sa bisan unsang oras,
C, mao ang konsentrasyon sa indeyksiyon, nga mao, ang kinatibuk-ang kantidad sa mga sangkap (peak area A).
(5) mga parameter sa kahusayan sa kolum
Sa usa ka kanunay nga tR, ang mas gamay nga W o w 1/2 (nga mao, ang mas pig-ot nga taluktok), mas dako ang gidaghanon sa teoretikal nga mga plato n, mas gamay ang theoretical plate nga gitas-on, ug mas taas ang separation efficiency sa kolum.Tinuod usab kini sa epektibo nga teorya nga tray neff.Busa, ang teoretikal nga gidaghanon sa mga tray usa ka indeks sa pagtimbang-timbang sa kahusayan sa mga kolum.
(5) Mga kinaiya ug mga kakulangan
> Mga bentaha
Ang teorya sa tray kay semi-empirical ug nagpatin-aw sa porma sa outflow curve
Ang mga proseso sa pagbahin ug pagbulag sa mga sangkap gihulagway
Gisugyot ang usa ka indeks sa pagtimbang-timbang sa kaepektibo sa kolum
> Limitasyon
Ang mga sangkap dili gyud makaabot sa ekwilibriyo sa pag-apod-apod sa duha ka hugna:
Ang longhitudinal nga pagsabwag sa mga sangkap sa kolum dili mahimong ibalewala:
Ang impluwensya sa lainlaing mga kinetic nga mga hinungdan sa proseso sa pagbalhin sa masa wala gikonsiderar.
Ang relasyon tali sa epekto sa kolum ug tulin sa dagan sa mobile phase dili mapasabut:
Dili klaro kung unsa ang nag-unang mga hinungdan nga nakaapekto sa epekto sa kolum
Kini nga mga problema maayo nga nasulbad sa teorya sa rate.
2. Teorya sa rate
Niadtong 1956, ang Dutch nga iskolar nga si VanDeemter et al.misuhop sa konsepto sa tray theory, ug gikombinar ang kinetic factor nga nakaapekto sa gitas-on sa tray, gibutang sa unahan ang kinetic theory sa chromatographic process - rate theory, ug nakuha ang VanDeemter equation.Giisip niini ang proseso sa chromatographic isip usa ka dinamikong proseso nga dili balanse ug gitun-an ang impluwensya sa kinetic nga mga hinungdan sa paglapad sa peak (ie, epekto sa kolum).
Sa ulahi, si Giddings ug Snyder et al.misugyot sa liquid chromatography rate equation (nga mao ang Giddings equation) base sa VanDeemter equation (sa ulahi gitawag nga gas chromatography rate equation) ug sumala sa property difference tali sa liquid ug gas.
(1) Van Deemter equation
Diin: H: mao ang gitas-on sa pisara
A: coefficient sa termino sa eddy diffusion
B: coefficient sa termino sa pagsabwag sa molekula
C: coefficient sa termino sa pagsukol sa mass transfer
(2) Giddings equation
Quantitative ug qualitative analysis
(1) Kwalitatibo nga pagtuki
Ang qualitative chromatographic analysis mao ang pagtino sa mga compound nga girepresentahan sa matag chromatographic peak.Tungod kay ang lainlaing mga substansiya adunay piho nga mga kantidad sa pagpadayon sa ilawom sa pipila nga mga kondisyon sa chromatographic, ang kantidad sa pagpabilin mahimong magamit ingon usa ka indeks sa kwalitatibo.Ang lain-laing chromatographic qualitative nga mga pamaagi sa pagkakaron gibase sa retention values.
Bisan pa, ang lainlaing mga substansiya mahimong adunay parehas o parehas nga mga kantidad sa pagpadayon sa ilawom sa parehas nga mga kondisyon sa chromatographic, nga mao, ang mga kantidad sa pagpadayon dili eksklusibo.Sa ingon lisud ang pag-ila sa usa ka hingpit nga wala mailhi nga sample base sa mga kantidad sa pagpabilin lamang.Kung base sa pagsabot sa tinubdan, kinaiyahan ug katuyoan sa sample, mahimo ang pasiuna nga paghukom sa komposisyon sa sample, ug ang mosunod nga mga pamaagi mahimong gamiton aron mahibal-an ang compound nga girepresentahan sa chromatographic peak.
1. Kuwalitatibo nga pagkontrol gamit ang puro nga mga substansiya
Ubos sa pipila ka mga kondisyon sa chromatographic, ang usa ka wala mailhi adunay gitakda nga oras sa pagpabilin.Busa, ang wala mahibal-an mahimong mailhan sa kwalitatibo pinaagi sa pagtandi sa oras sa pagpabilin sa nahibal-an nga puro nga sangkap sa ilawom sa parehas nga mga kondisyon sa chromatographic sa oras sa pagpabilin sa wala mailhi nga sangkap.Kung ang duha managsama, ang wala mailhi nga sangkap mahimo nga usa ka nahibal-an nga lunsay nga sangkap;Kung dili, ang wala mahibal-an dili ang putli nga substansiya.
Ang paagi sa pagkontrol sa lunsay nga substansiya magamit lamang sa wala mailhi nga substansiya kansang komposisyon nahibal-an, kansang komposisyon medyo yano, ug kansang lunsay nga substansiya nahibal-an.
2. Relative retention value nga pamaagi
Ang relatibong retention value α, nagtumong sa adjustment tali sa component i ug reference materials Ratio sa retention values:
Nagbag-o lamang kini sa pagbag-o sa temperatura sa fixative ug kolum, ug wala’y kalabotan sa ubang mga kondisyon sa pag-operate.
Sa usa ka piho nga yugto sa paghunong ug temperatura sa kolum, ang gibag-o nga mga kantidad sa pagpadayon sa sangkap i ug reference substance s gisukod matag usa, ug dayon kalkulado sumala sa pormula sa ibabaw.Ang nakuha nga relatibo nga mga kantidad sa pagpadayon mahimong kuwalitatibo nga itandi sa katumbas nga mga kantidad sa literatura.
3, pagdugang nahibal-an nga mga sangkap aron madugangan ang pamaagi sa taas nga taas
Kung adunay daghang mga sangkap sa wala mailhi nga sample, ang nakuha nga mga chromatographic peak labi ka dasok aron dali mailhan pinaagi sa pamaagi sa ibabaw, o kung ang wala mailhi nga sample gigamit lamang alang sa piho nga pagtuki sa butang.
"Una ang usa ka chromatogram sa usa ka wala mailhi nga sample gihimo, ug dayon usa ka dugang nga chromatogram makuha pinaagi sa pagdugang usa ka nahibal-an nga sangkap sa wala mailhi nga sample."Ang mga sangkap nga adunay dugang nga taas nga taas mahimong mahibal-an alang sa ingon nga mga sangkap.
4. Hupti ang qualitative nga pamaagi sa indeks
Ang retention index nagrepresentar sa retensyon nga kinaiya sa mga substance sa fixatives ug sa pagkakaron mao ang pinaka kaylap nga gigamit ug giila sa tibuok kalibutan nga qualitative index sa GC.Kini adunay mga bentaha sa maayo nga reproducibility, uniporme nga sumbanan ug gamay nga temperatura coefficient.
Ang indeks sa pagpabilin nalangkit lamang sa mga kabtangan sa naghunong nga hugna ug sa temperatura sa kolum, apan dili sa ubang mga kondisyon sa eksperimento.Ang pagkatukma ug pag-reproducibility niini maayo kaayo.Hangtud nga ang temperatura sa kolum parehas sa naghunong nga yugto, ang kantidad sa literatura mahimong magamit alang sa pag-ila, ug dili kinahanglan nga gamiton ang putli nga materyal alang sa pagtandi.
(2) Pagtuki sa quantitative
Basihan sa chromatographic quantification:
Ang tahas sa quantitative analysis mao ang pagpangita sa gatusan ka mga component sa mixed sample
Fractional nga sulod.Ang Chromatographic quantification gibase sa mosunod: kung ang mga kondisyon sa pag-opera parehas, mao
Ang masa (o konsentrasyon) sa gisukod nga sangkap gitino pinaagi sa tubag nga signal nga gihatag sa detector
Kini proporsyonal.Nga mao:
Basihan sa chromatographic quantification:
Ang tahas sa quantitative analysis mao ang pagpangita sa gatusan ka mga component sa mixed sample
Fractional nga sulod.Ang Chromatographic quantification gibase sa mosunod: kung ang mga kondisyon sa pag-opera parehas, mao
Ang masa (o konsentrasyon) sa gisukod nga sangkap gitino pinaagi sa tubag nga signal nga gihatag sa detector
Kini proporsyonal.Nga mao:
1. Pamaagi sa pagsukod sa peak area
Ang peak area mao ang batakang quantitative data nga gihatag sa chromatograms, ug ang katukma sa peak area measurement direktang makaapekto sa quantitative nga resulta.Lainlain nga mga paagi sa pagsukod ang gigamit alang sa chromatographic nga mga taluktok nga adunay lainlaing mga porma sa taluktok.
Lisud ang pagpangita sa eksaktong bili sa tingtugnaw sa quantitative analysis:
Sa usa ka bahin tungod sa kalisud sa tukma nga pagsukod sa hingpit nga gidaghanon sa indeyksiyon: sa laing bahin
Ang peak area nagdepende sa mga kondisyon sa chromatographic, ug ang chromatographic strip kinahanglan nga ipadayon kung ang kantidad gisukod.
Dili mahimo o kombenyente nga buhaton ang parehas nga butang.Ug bisan kung mahimo nimo kini nga husto
Ang eksakto nga kantidad, tungod usab kay wala’y hiniusa nga sukaranan ug dili direkta nga magamit.
2.Quantitative correction factor
Kahulugan sa quantitative correction factor: gidaghanon sa mga sangkap nga mosulod sa detector (m)
Ang ratio sa iyang chromatographic peak area (A) o peak height () kay usa ka proportionality constant (,
Ang kanunay nga proporsyonalidad gitawag nga absolute correction factor alang sa component.
Lisud ang pagpangita sa eksaktong bili sa tingtugnaw sa quantitative analysis:
Sa usa ka bahin tungod sa kalisud sa tukma nga pagsukod sa hingpit nga gidaghanon sa indeyksiyon: sa laing bahin
Ang peak area nagdepende sa mga kondisyon sa chromatographic, ug ang chromatographic strip kinahanglan nga ipadayon kung ang kantidad gisukod.
Dili mahimo o kombenyente nga buhaton ang parehas nga butang.Ug bisan kung mahimo nimo kini nga husto
Ang eksakto nga kantidad, tungod usab kay wala’y hiniusa nga sukaranan ug dili direkta nga magamit.
Sa ato pa, ang relatibong correction factor 'sa usa ka component mao ang component ug ang reference material s
Ang ratio sa hingpit nga mga hinungdan sa pagtul-id.
Makita nga ang relatibong correction factor kung ang kalidad sa component kumpara sa standard.
Kung ang substansiya s managsama, ang peak area sa reference material mao ang peak area sa component
Daghan.Kung ang pipila ka sangkap adunay mass m ug peak area A, nan ang gidaghanon sa f'A
Ang mga kantidad parehas sa peak area sa reference nga materyal nga adunay masa sa.Sa laing pagkasulti,
Pinaagi sa relative correction factor, ang peak area sa matag component mahimong mabulag
Nakabig ngadto sa kinapungkayan nga dapit sa reperensiya nga materyal nga katumbas sa iyang masa, unya ang ratio
Ang sumbanan nagkahiusa.Mao nga kini ang normal nga pamaagi aron mahibal-an ang porsyento sa matag sangkap
Ang basehan sa gidaghanon.
Pamaagi sa pagkuha sa relative correction factor: relative correction factor values gitandi lang sa being
Ang pagsukod nalangkit sa standard ug sa matang sa detector, apan sa operation strip
Dili igsapayan.Busa, ang mga mithi mahimong makuha gikan sa mga pakisayran sa literatura.Kung ang text
Kung dili nimo makit-an ang gitinguha nga kantidad sa paghalad, mahimo usab nimo kini mahibal-an sa imong kaugalingon.Pamaagi sa determinasyon
Pamaagi: Usa ka piho nga kantidad sa gisukod nga substansiya napulo ka pinili nga reference nga materyal → gihimo sa usa ka piho nga konsentrasyon
Ang chromatographic peak nga mga lugar A ug As sa duha ka mga sangkap gisukod.
Mao kana ang pormula.
3. Quantitative nga pamaagi sa kalkulasyon
(1) Pamaagi sa normalisasyon sa lugar
Ang sumada sa sulod sa tanang peak-free fractions gikalkulo isip 100% para sa quantification
Ang pamaagi gitawag nga normalisasyon.Ang pormula sa pagkalkula niini mao ang mosunod:
Diin ang P,% mao ang porsyento nga sulod sa gisulayan nga mga sangkap;A1, A2... A n kay component 1. Ang peak area sa 1~n;f'1, f'2... f'n mao ang relatibong correction factor alang sa mga sangkap 1 ngadto sa n.
(2) eksternal nga sumbanan nga pamaagi
Ang pamaagi sa quantitative nga pagtandi tali sa tubag nga signal sa component nga sulayan sa sample ug ang putli nga component nga sulayan isip kontrol.
(3) Internal nga sumbanan nga pamaagi
Ang gitawag nga internal standard nga pamaagi mao ang usa ka pamaagi diin ang usa ka piho nga kantidad sa puro nga substansiya idugang sa standard nga solusyon sa nasulayan nga substansiya ug ang sample nga solusyon isip internal nga sumbanan, ug dayon analisa ug determinado.
(3) standard nga pamaagi sa pagdugang
Ang standard nga pamaagi sa pagdugang, nailhan usab nga internal nga pamaagi sa pagdugang, mao ang pagdugang sa usa ka piho nga kantidad sa (△C)
Ang pakisayran sa sangkap sa pagsulay gidugang sa sampol nga solusyon nga sulayan, ug ang pagsulay gidugang sa pagsulay
Ang kinapungkayan sa sampol nga solusyon pagkahuman sa substansiya mas taas kaysa sa orihinal nga sampol nga solusyon
Ang pagdugang sa lugar (△A) gigamit sa pagkalkulo sa konsentrasyon sa substansiya sa sample nga solusyon
Sulod (Cx)
Diin ang Ax mao ang peak area sa substance nga sukdon sa orihinal nga sample.
Oras sa pag-post: Mar-27-2023